- アガロースゲルからのDNA回収法
- アガロースゲルで分離したDNAを精製するためには、以下の方法を用いる。
- 準備:
- 底に針で穴をあけた 0.5ml容量のエッペンチューブにグラスウールをつめ、さらに、それをフタの切った1.5ml容量のエッペンチューブに入れる。(スパンカラムの作成)
方法:
- 目的のDNAを含むバンドをカバーガラスでゲルから切り出し、スパンカラムに入れる。
- 2000回転から徐々に10000回転まで回転数を上げ 10分間遠心する。
溶出液を新しいチューブに移す。
- (2)を繰り返し、溶出液を前項のチューブに移す。
- 1/10量の4M NaClを加えた後、撹拌する。
- 0.7倍量のイソプロパノールを加え、再び撹拌し、室温で10分間静置する。
- 14000回転で10分間遠心。
- 上清を捨て70%エタノールを加え さらに10分間遠心する。
- 上清を捨て、乾燥させた後 20μl のTEに懸濁する。
