ゲノムDNAの調整法（ミニプレップ）

　ゲノムDNAの解析、PCR用のテンプレートの作成のためのゲノムDNAの調製方法で、短時間にDNAを得るのに適している。

準備：

LiCl-TritonX-100

2.5M LiCl, 50mM Tris pH8.0
4% TritonX-100
62.5mM EDTA pH8.0

フェノール：クロロホルム（1:1）

方法：

1. 1mlの液体培地で28℃、一晩振盪培養する。
2. 1.5mlチューブに移し、15000rpmで５分間遠心集菌する。
3. 上清を捨て、200μlのLiCl-TritonX-100に懸濁する。
4. 200μlのフェノール：クロロホルム（1:1）を加え、0.4gのグラスビーズの入ったフタ付きチューブに入れる。
5. FirstPrep 120( BIO-101)にチューブをセットし、スピード5.0で20秒間、細胞破砕を行う。
6. 15000 rpmで20分間遠心し、上清をチップで1.5mlチューブに移す。
7. 200μlのクロロホルムを入れ、軽くボルテックスし、15000rpmで10分間遠心する。
8. 上清を新しい1.5mlチューブに移し、500μlの100 %エタノールを加え、軽くボルテックスし、-80℃に20分間静置する。
9. 15000 rpmで4℃で30分間遠心する。
10. 上清を捨て、沈殿を70%エタノールで洗い、乾燥させる。
11. 20-50μlのTEに懸濁する。